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IgM類單克隆抗體純化試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

更新時間:2015-05-26      瀏覽次數(shù):955

IgM類單克隆抗體純化試劑盒使用說明書

                                                            立可純C080202(50ML純化量)

試劑原理:

本試劑盒利用不同類別免疫球蛋白結(jié)構(gòu)特性,通過大量實驗分析驗證而得到的一個與傳統(tǒng)純化*不同的精細(xì)的具有高活性、高產(chǎn)率、快速以及良好重復(fù)性的單克隆抗體的純化方法,本試劑盒所用材料對人體沒有損害,安全環(huán)保。

試劑特點:

           本試劑盒特點在于純化操作的簡單化、所得抗體的高活性和高純度。實驗表明,本試劑盒可以得到95%左右純度的抗體;并且由于配方考究,抗體在純化過程中幾乎沒有損傷,*保持應(yīng)有的活性,實際應(yīng)用*。

適用范圍:

         本試劑盒僅適用于小鼠IgM類單克隆抗體腹水的純化,不能用于其它Ig類或亞類單克隆抗體腹水的純化實驗,如需要可選擇立可純系列其它貨號的純化試劑,它能為您帶來滿意結(jié)果。

試劑組成:

 

試劑名稱

數(shù)量

試劑名稱

數(shù)量

純化液A

65ml

30X濃縮透析液

150ml

純化液B

    50mL

透析袋

1根

純化液C

    30mL

說明書

1份

純化液D

    40mL

空白不干膠標(biāo)簽

2片

 

純化步驟:

1、將單克隆抗體腹水從冰箱中取出,室溫避光放置15分鐘,然

后用涼水邊沖邊搖勻快速解凍。

2、將化開的單克隆抗體腹水12000RPM 4-37℃離心10-20分鐘。

3、先吸棄zui上面浮沫和油脂,然后將上清轉(zhuǎn)出到另一個干凈容器或離心管;按每1毫升單克隆抗體腹水加入純化液A 1.3毫升,室溫避光倒轉(zhuǎn)20分。

4、8000RPM 4-37℃離心10-20分鐘,沉淀用純化液B溶解到原單克隆抗體腹水1/2體積;再按每毫升加入純化液C 1.2毫升,室溫避光倒轉(zhuǎn)10分鐘。

5、8000RPM 4-37℃離心10-20分鐘,棄沉淀收集上清;每1.1毫升上清液加純化液D 1.2毫升,室溫避光倒轉(zhuǎn)20分鐘。

6、8000RPM 4-37℃離心10-20分鐘,收集沉淀用純化液B收集溶解沉淀到原單克隆抗體腹水體積的1/2。

7、透析袋用PBST浸泡3-5分鐘,然后用手揉捏數(shù)次,自來水沖凈后接純水沖洗干凈,將純化好的抗體放入用透析夾或繩扎緊。

8、透析液用純水稀釋30倍,將要透析的抗體袋子放入??贵w體積:透析液體積=1:50,4℃攪拌透析每次1小時,共3-4次。

9、8000RPM 4-37℃離心10-20分鐘,收集上清測蛋白濃度并調(diào)控在5mg/ml左右zui后加10/萬NaN3防腐并除菌過濾4℃?zhèn)溆谩?/SPAN>

注意事項:

1、溶血和腐敗的腹水不得用于純化(血性腹水離心后除去紅細(xì)胞等可正常純化)。

2、離心溫度不要超過37℃。

3、操作和量取試劑要細(xì)致。

4、不攪拌透析每次時間不得低于2小時。

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