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上海信帆為大家:實(shí)驗(yàn)室常規(guī)試劑的配制方法

更新時(shí)間:2015-08-31      瀏覽次數(shù):1097

 上海信帆生物銷售一些實(shí)驗(yàn)室常用的生化試劑,但是很多其實(shí)大家是可以自行配制的,現(xiàn)在我們就配制方法給大家分享一下,希望對(duì)大家有用。

 一.常用貯液與溶液 1mol/L亞精胺(ermidine): 溶解2.55g亞精胺于足量的水中,使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。 1mol/L精胺(ermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使終體積為10ml。分...

關(guān)鍵詞:常用實(shí)驗(yàn)溶解水中培養(yǎng)100ml

實(shí)驗(yàn)常用試劑的制備與儲(chǔ)藏

一.常用貯液與溶液
1mol/L亞精胺(ermidine): 溶解2.55g亞精胺于足量的水中,使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。
1mol/L精胺(ermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。
10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):將77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔徑的濾膜過(guò)濾除菌。
10mg/ml牛血清蛋白(A):加100mg的牛血清蛋白(組分V或分子生物學(xué)試劑級(jí),無(wú)DNA酶)于9.5ml水中(為減少變性,
須將蛋白加入水中,而不是將水加入蛋白),蓋好蓋后,輕輕搖動(dòng),直至牛血清蛋白*溶解為止。不要渦旋混合。加水定容到10ml,然后分裝成小份貯存于-20℃。
1mol/L二硫蘇糖醇(DTT):在二硫蘇糖醇5g的原裝瓶中加32.4ml水,分成小份貯存于-20℃?;蜣D(zhuǎn)移100mg的二硫蘇糖醇
至微量離心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫蘇糖醇溶液。
8mol/L乙酸鉀(potaium acetate):溶解78.5g乙酸鉀于足量的水中,加水定容到100ml。
1mol/L氯化鉀(KCl):溶解7.46g氯化鉀于足量的水中,加水定容到100ml。
3mol/L乙酸鈉(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸鈉于約90ml水中,用冰乙酸調(diào)溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。
0.5mol/L
EDTA:配制等摩爾的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三鈉鹽。或稱取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。
1mol/L HEPES:將23.8gHEPES溶于約90ml的水中,用NaOH調(diào)pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。
1mol/L HCl:加8.6ml的濃鹽酸至91.4ml的水中。
25mg/ml IPGT:溶解250mg的IPGT(異丙基硫代-β-D-半乳糖苷)于10ml水中,分成小份貯存于-20℃。
1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中,定容到100ml。
100mmol/L PMSF:溶解174mg的PMSF于足量的異丙醇中,定容到10ml。分成小份并用鋁箔將裝液管包裹
或貯存于-20℃。
20mg/ml蛋白酶K(proteinase
K):將200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,輕輕搖動(dòng),直至蛋白酶K*溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml,然后分裝成小份貯存于-20℃。
10mg/mlRnase(無(wú)DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白R(shí)NA酶于1ml的10mmol/L的乙酸鈉水溶液中(pH
5.0)。溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的Tris-HCl調(diào)pH至7.5,于-20℃貯存。(配制過(guò)程中要戴手套)
5mol/L氯化鈉(NaCl):溶解29.2g氯化鈉于足量的水中,定容至100ml。
10N氫氧化鈉(NaOH):溶解400g氫氧化鈉顆粒于約0.9L水的燒杯中(磁力攪拌器攪拌),氫氧化鈉*溶解后用水定容至1L。
10%SDS(十二烷基硫酸鈉):稱取100gSDS慢慢轉(zhuǎn)移到約含0.9L的水的燒杯中,用磁力攪拌器攪拌直至*溶解。用水定容至1L。

2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36.4g山梨(糖)醇于足量水中使終體積為100ml。
100%(TCA):在裝有500gTCA的試劑瓶中加入100ml水,用磁力攪拌器攪拌直至*溶解。(稀釋液應(yīng)在臨用前配制)
2.5% X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷):溶解25mg的X-gal于1ml的二甲基甲酰胺(DMF),用鋁箔包裹裝液管,貯存于-20℃。

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