六胺銀染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)

六胺銀染色簡(jiǎn)介：

六胺銀染色是一種經(jīng)典顯示基底膜的方法。經(jīng)過改良之后,組織經(jīng)鉻酸氧化，使真菌內(nèi)的黏多糖暴露出醛基，醛基把六胺銀還原為黑色的金屬銀。氯化金可使金屬銀轉(zhuǎn)變?yōu)楦€(wěn)定的金屬金，同時(shí)使背景更清晰。海波可以固定并洗去未還原的銀離子。

六胺銀染色實(shí)驗(yàn)步驟（僅供參考）：

1、六胺銀固定于甲醛固定液中，常規(guī)脫水包埋。切片4微米，脫蠟至水洗。

2、切片入氧化劑氧化20分鐘。流水稍洗。

3、入漂白液處理1分鐘，以除去氧化劑。

4、流水沖洗5分鐘，蒸餾水浸洗2次，每次30秒至60秒。

5、切片放入配制好的預(yù)熱至60度的六胺銀工作液中，加蓋60度恒溫染色大約20至60分鐘，切片呈淡黃色即取出經(jīng)水洗后顯微鏡觀察是否有菌體出現(xiàn)。如有淡棕色菌體出現(xiàn)，應(yīng)每隔5到10分鐘觀察一次以控制菌體著色深淺，直至顯色理想；

6、入蒸餾水中清洗。

7、用氯化金溶液調(diào)色1到2分鐘。蒸餾水洗1到2分鐘。

8、置于海波溶液2分鐘。流水沖洗5分鐘。

9、滴加橙黃G一小滴復(fù)染1秒即用水沖洗。染色時(shí)間不能過長(zhǎng)，否則將影響最終效果。

10、流水沖洗20秒-60秒。

11、常規(guī)脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。染色完成。

染色結(jié)果：真菌黑色，背景淺紅色

六胺銀染色實(shí)驗(yàn)代測(cè)